柱后衍生-高效液相色谱-荧光检测法测定水中农药呋喃丹
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呋喃丹（克百威，Carbofuran)是一种内吸型高毒农药，属氨基甲酸酯类杀虫剂，广泛用于各种粮食作物，对环境生物毒性很强，特别是鸟类，其在土壤中的残蹈期较长，迁移性较大，在降水量大、地下水位浅的砂土地区易引起对地下水的污染。美国EPA认为呋喃丹对人的神经有毒害作用，饮用水中呋喃丹限值为0.04mg/八。我国也将其列为高毒性农药，规定不得使用和限制使用，在渔业水质标准2、新版的生活饮用水卫生标准)对其限定值分别为0.01和0.007mg/L。
目前报道的呋喃丹检测方法有气相色谱一氨磷检测器固相萃取一液相色谱紫外检测、液质直接进样测定等4卫生部发布的《生活饮用检验方法》(GB5750-2006)中使用高效液相柱后衍生法测定水中的呋喃丹，笔者参照国标方法，并结合实验室自身条件，采用固相萃取一柱后衍生高效液相色谱荧光检测法测定水中呋喃丹的含量，简化了水样的前处理步稀，提高了检测灵敏度，避免了杂质于扰，定性、定量、准确可靠，完全能满足水质监测的要求。
1材料与方法
1.1仪器与试剂
Agilent1100高效液相色谱仪，自动进样器，荧光检测器；Pickering Vector PCX柱后衍生仪；氮吹仪N-EVAP;Supelco固相萃取装置，Supelclean ENVI-.l8SPE小柱(6ml);氨基甲酸酯类农药分析C18专用柱(4.6mm×150mm),ChemStation色谱工作站。
呋喃丹（国家标准物质研究中心），甲醇（默克公罚，色谱纯)，氨基甲酸酯测试混标、邻苯二甲醛(OPA)、2-巯基乙醇(Thiofluor)均为Pickering实验室生产，试验用水电导大于18.0M/cm。衍生试剂为美国Pickering公司生产的试剂包，含邻苯二甲醛溶液(ct.NoCB910)和水分解衍生试剂(cat.NoCB130)。
1.2测定条件
柱后衍生仪条件：反应器，100℃，0.5m；反应器2，环境遨度，0.】ml;衍生试剂流速0.3ml/min。
液相色谱条件：梯度洗脱（程序见表1、2），柱温42℃，流动相为甲醇、水，荧光检测器Aex330nm、Aem465nm,流动
相流速1,0ml/min。保留时间定性，蜂面积定量。
表1固相萃取流动相的梯度洗脱程序
Table 1 The gradient elution program of solid phase extraction mobile phase
1.3衍生试剂的配制
衍生试剂1：将水分解衍生试剂C130直接注入到1号试剂瓶中，摇匀，盖上瓶盖，通氮气至少10min,待用。至少可保存1周。
衍生试剂2：注入945ml0PA稀释剂(CB910)到2号试剂瓶中，盖上瓶盖用氨气吹扫至少10mi。在吹扫时，称取100 mg OPA固体溶解于10ml的甲醇中，用5 ml OPA稀释液(CB910)溶解2g2-巯基乙醇固体，配制好后，立即将以上2种溶液分别迅速加人到2号已去氧的试剂瓶中(OPA在空气中极易被氧化，2巯基乙醇恶臭)，盖上瓶盖，打开气流，再不断地吹扫几分钟，关闭排气阀，轻轻地搅动溶剂以使其完全混合。至少可保存1周。
1.4样品的采集与保存
用棕色玻璃瓶采集水样200ml,采样时不得留有顶上空间和气泡，呋喃丹在碱性及中性条件下不稳定，用硫酸调节水样pH值<2.0。当水中有余氯存在时加人硫代硫酸钠1，使其在水中的浓度约80mg/L,并混匀。水样采集后应尽快分析，若不能及时分析，应避光保存于4℃下冷藏，但不超过7d。
1.5水样前处理
分别依次用10m甲醇、纯水浸润和淋洗SPE小柱，活化备用。取200ml水样，以5ml/min左右的流量通过SPE柱。富集完毕后，用10m纯水淋洗小柱，吹干小柱，然后用6l甲醇分2次洗脱SPE柱，收集淋洗液，氮气吹至近干后，用甲醇定容至1ml,上机测定。
2结果与分析
2.1，12种氨基甲酸酯标准色谱图
氨基甲酸酯测试混标(约2.5mg/L)进样5l,标准色谱图见图1。出峰时间先后排列为：涕灭威亚砜5.70min、涕灭威砜6.28min、杀线威6.97min、灭多威7.84min、3-羟基呋喃12.78min、涕灭威16.35min、残杀威19.99min、呋喃丹20.39min、甲萘威21.62min、1-萘酚22.55min、甲硫减27.88min、4-溴-3,5-二甲苯基-N-甲基氨基甲酸酯28.64min。从色谱图来看12种氨基甲酸酯在此条件下测试均有良好的峰型和分离度，说明该试险方法不仅适用于呋喃丹的检测，也适用以上其他氨基甲酸酯类的定性检测。
2.2标准曲线线性范围
准确吸取呋喃丹标准样品，配置标准系列溶液，浓度分别为50、100、250、5000、1000g/L,以所得响应值（峰面积）与浓度进行回归分析。结果表明，线性相关系数为0.9998，线性关系良好，符合定量测试的要求。
2.3检测限、回收率
以3倍信噪比(S/N)计算，在进样量10l时，计算得到呋喃丹的最低检测质量为0.072g,若取水样200ml经富集后测定，水样检测限达0.036g/L。
分别配置0.6、1.0和3.0g/L的自来水、河水加标水样，按“1.5”方法进行处理测定，计算回收率和精密度。测定结果表明，2种组分平均回收率分94.3%96.3%及91.5%~92.4%:6次平行测定的相对标准偏差分别为8.0%~10.2%及8.4%~9.9%，均满足定量分析要求，结果见表3。
表3’呋喃丹的回收率及精密度测定结果(n=6)
2,4大体积直接进样法测定
参照美国环境保护署EPA的方法531.1，采用直接大体积进水样试验（梯度方法见表2)。为了避免水蜂的影响，梯度洗脱与固相萃取浓缩甲醇进样（表1）有所不同。安捷伦一般的液相色谱仪的最大进样
量为100l,直接进样100l,对加标浓度60,200g/L的自来水、河水各进样6次，试验结果表明氨基甲酸酯混标的12种物质均有具有良好的峰型和分离度，2种加标浓度的呋喃丹在自来水和河水中的平均回收率及相对标准偏差见表3。
按3倍的信噪比计算检出限约为90吧北远低毛生济件用水卫生标准(GB/T5749-2006)》中的限制值70甲g凭，完全能满足国标的要求。
3结论
该研究采用固相萃取提取柱后衍生法高效液相色谱测定水中的呋喃丹，灵敏度高、选择性好，能分离包括呋喃丹在内的12种氨基甲酸酯，从而全面监测水中的氨基甲酸酯类污染物。固相萃取前处理方法用甲醇进行洗脱，回收率高且稳定。线性关系和重现性等方法学指标，均能较好地满足相关单位对检测方法的要求。直接进水样测定，省去了繁琐的水样前处理过程，提高了检测速度，对突发的水污染事件能迅速地进行半定量分析，及时作出判断，更好地服务于水质监测工作，确保供水安全。
完整论文见下图
